pcr如何设置对照

rtpcr数据分析中的对照是阴性对照吗: 这个对照是自己定义的，要在method里面说明，一般是选择阴性对照。

定量RT-PCR需要设置不同的阳性和阴性对照，这是为什么？？: 我来作补充：
阴性对照很容易理解，如果阴性都P出来了，说明有污染，实验不可信；
阳性对照一方面是质控，如果阳性都没p出来，说明实验体系、条件和过程有问题，实验同样失败；另一方面，既然是定量PCR，要定量准确，需要有一系列的梯度阳性体系，做出标准曲线，才能对未知样品定量，就如同测定蛋白浓度或酶活，必须用标准品蛋白或已知酶活性的酶做梯度曲线，才能给未知样品定量。
若有疑问，欢迎继续讨论，纯属手打，欢迎采纳，祝愉快！

定量PCR阴性对照用什么水: 主要看你的CT值大约是多少，如果很大（大于40循环）那么可以判定结果没有问题，如果跟目的基因的CT一致或者为其他CT值那么判断为模板造成的气溶胶污染或者其他外缘DNA造成的污染。另外你阴性对照加的是水，那么说明你做梯度稀释的时候用的也是灭菌水，这个做荧光定量试验是很不规范的，建议用专门的荧光定量稀释液去做。

PCR进行中时，阳性对照选择什么试剂: 近期敦故侦查藏诨

定量pcr中，空白对照曲线什么样: 你说的空白对照应该是不加模板，用水代替模板吧。空白对照的溶解曲线和扩增曲线都是没有峰的。希望可以帮到你

菌落pcr电泳条带很淡,但是阳性对照却很亮，阴性对照也有淡淡的条带,为啥，: 初步判断有污染。
最好上图来看看，不然很难判断

做荧光定量pcr试验，按时间点取样,是不是每个时间点都得取个对照？: 对, 每个时间点都得取个对照
普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好，而是两者应用与不同的领域，起到了不同的作用。
荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物，从而可进行绝对定量或者相对定量。

16S 做PCR扩增 ，阴性对照有污染，全部试剂都换过了，污染依旧啊！！求大神指点！！！: 污染的条带大小与阳性一样？可以回收污染的条带，测序看看怎么回事，然后进行下一步